今天我們講實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的另一種離心方法：差速離心法。差速離心法是交替使用低速和高速離心，用不同強(qiáng)度的離心力使具有不同質(zhì)量的物質(zhì)分級(jí)分離的方法。此法適用于混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大組分的分離。

1．工作原理

通常兩個(gè)組分的沉降系數(shù)差在10倍以上時(shí)可以用此法分離。例如某樣品中有大、中、小三個(gè)組分，用差速離心法分離時(shí)，把樣品放在離心管內(nèi)，先按大組分的沉降系數(shù)選擇離心轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間，當(dāng)離心結(jié)束時(shí)正好使大組分全部沉降到離心管底部，這時(shí)中小組分中的一部分也會(huì)沉降到底部。若原始樣品液中三個(gè)組分的含量相等，則在原始樣品液中大組分占總組分量的三分之一。通過一次離心后分離出的大組分沉淀占總組分量約90%。如要進(jìn)一步提純可以把此沉淀物再溶解，再按大組分的沉降條件離心，得到大組分的第二次離心沉淀。通過多次對(duì)沉淀和上清液差速離心，可以把三個(gè)沉降系數(shù)有差別的組份分離提純，所以這個(gè)方法又稱為分步離心法。

2．差速離心法的優(yōu)缺點(diǎn)

差速離心法的優(yōu)點(diǎn)是樣品的處理量較大，可用于大量樣品的初分離。其缺點(diǎn)是分離復(fù)雜樣品和要求分離純度較高時(shí)，離心次數(shù)多，操作繁雜。由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀，容易引起中間損失，所以離心分辨力差。實(shí)際分離時(shí)由于離心時(shí)的對(duì)流、擴(kuò)散和收取沉淀時(shí)的污染，對(duì)于一些沉降系數(shù)相差不大的組分無法進(jìn)行*的分離提純。產(chǎn)品的純度和回收率都達(dá)不到上述理論值。因此差速離心法主要用于大量樣品的初步分離提純。

使用離心機(jī)進(jìn)行密度梯度離心和差速離心的差別主要有三點(diǎn)：

1．差速離心法是用不同強(qiáng)度的離心力使具有不同質(zhì)量的物質(zhì)分級(jí)分離，密度梯度離心中單一樣品組份的分離是借助于混合樣品穿過密度梯度層的沉降或上浮來達(dá)到的。

2．差速離心用兩個(gè)甚更多的轉(zhuǎn)速，而密度梯度離心只用一個(gè)離心轉(zhuǎn)速。

3．差速離心是適用于混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大組分，而密度梯度離心的物質(zhì)是密度有一定差異的。

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